成功建立CHOZN® 细胞单克隆转染筛选平台

日期: 2018-08-28

默克公司的CHOZN®哺乳动物细胞表达体系采用CompoZr®锌指核酸酶(ZFN)技术敲除CHO-K1细胞株的内源谷氨酰胺合成酶(GS)基因,从而使该细胞生长过程必须依赖外源L-谷氨酰胺的添加,形成天然的筛选标记,同时又摆脱了GS系统对L-蛋氨酸砜亚胺(MSX)的依赖。CHOZN®表达体系具有克隆筛选操作简单、周期短;重组细胞的表达水平高、稳定性好;适于大规模生产的优点。

公司在2018年引进默克公司(Merck)CHOZN®哺乳动物细胞表达体系,可在短时间内得到产量高、稳定性好的单克隆细胞株。现有CHOZN®表达体系的蛋白产量可达到2-5 g/L。并且可提供符合FDACFDA要求的细胞来源、单克隆筛选历史等证明性文件。

为满足FDACFDA关于细胞单克隆源性的要求,公司引进了96孔板高分辨率成像系统-----Cell Metric CLD细胞成像系统。在单克隆筛选过程中,通过对96孔板每个孔进行高分辨成像,每个孔内的细胞从第一天就被清楚辨别和记录,在接下来的细胞增殖过程中,定期监控,对单克隆细胞进行快速的识别,定量和追踪,并自动生成符合FDA标准的细胞单克隆源性报告。

通过将CHOZN®平台与Cell Metric CLD细胞成像系统相结合,只需经过一轮有限稀释,在4-6周内即可得到来源明确的高产稳定性单克隆细胞株。从而大大缩短了从细胞转染到得到单克隆细胞株的筛选流程及时间,节省项目开发时间。